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类大疱病和大疱病患者肿瘤坏死因子α及可溶性肿瘤坏死因子Ⅰ型受体的测定离心后分别取血清及上清液
文章来源：大疱病 发布时间:2014-11-25 12:22:40 点击数： 次
tnfα水平则明显低于对照
(三)elisa方法测定血清、疱液中tnfα、stnf-rⅰ:①从试剂盒(美国gibco公司生产)中取出所需已包被相应单抗的板条②加入标准品稀释液100μl至空白孔和零孔,将待测血清或疱液和已稀释的不同浓度的标准品各100μl加入相应孔中,用封板胶封住反应孔,37℃孵育90min,用清洗液洗板③除零孔外,每孔加稀释好的1∶600生物素标记二抗100μl,封住板孔,37℃孵育60min后洗板④除零孔外,每孔加稀释好的酶联物100μl,封住板孔,37℃孵育30min后洗板⑤每孔加底物a、b各50μl,避光,37℃孵育15min⑥每孔加终止液50μl,混匀⑦即刻在450nm波长的酶标仪下读数⑧制作标准曲线并根据标准曲线查找各标本相应浓度
9.14
4608±1416
±s
15
31
【摘要】目的 探讨肿瘤坏死因子α(tnfα)及其可溶性ⅰ型受体(stnf-rⅰ)在类大疱病(bp)、大疱病(pv)患者疱液和血清中的变化及其临床意义方法 应用elisa方法对比研究31例bp、9例pv患者血液和疱液中tnfα和stnf-rⅰ的含量并以15例正常人吸疱液和30例正常人血清作对照结果bp、pv患者活动期疱液和血液中stnf-rⅰ水平均高于对照,且疱液中浓度更高;bp缓解初期血中stnf-rⅰ水平高于活动期;bp患者血液和疱液中均未测到或有极少量tnfα,pv患者血液中仅测到低浓度的tnfα,而疱液中tnfα浓度明显高于对照结论 细胞因子stnf-rⅰ和tnfα可能参与了bp和pv的发病,stnf-rⅰ在bp中可能对机体起保护作用,有望成为病情好转和治疗有效的新的观察指标
<0.01
1568±785
±s
疱液
【 key words】 pemphigoid,bullous pemphigus tumor necrosis factor receptors,tumor necrosis factor
1671±567
正常人对照
类大疱病和大疱病患者肿瘤坏死因子α及可溶性肿瘤坏死因子ⅰ型受体的测定
组别
讨论 本研究对31例bp患者测定细胞因子结果表明:①bp疱液与血中stnf-rⅰ明显高于对照,且疱液中stnf-rⅰ又明显高于相应血清,说明皮损处能大量产生或浓缩stnf-rⅰ国外报道bp皮损处有大量可表达tnf-ri的浸润细胞如巨噬细胞[1],推测这些浸润细胞可能是stnf-rⅰ的来源因此,stnf-rⅰ与bp发病有关②患者缓解初期血中stnf-rⅰ水平比活动期高(p<0.01),提示其升高可能与病情好转有关,是否可将此作为观察病情的指标,是否其在高浓度时能拮抗tnfα的毒性而成为机体的一种保护机制,有待探讨另外,我们对2例未能缓解的bp患者随访测定stnf-rⅰ的水平未见其升高,反而降低,进一步说明stnf-rⅰ的水平与病情活动性相关③bp患者血液及疱液中tnfα含量均低于对照组,推测可能是由于高浓度stnf-rⅰ结合了tnfα所致与尹国华[]报道相似,但与zentener的结果不完全相同[3]后者在疱液中测到大量与stnf-rⅰ结合而失活的tnfα我们的实验结果发现,疱液中tnfα浓度明显高于血液(p<0.05),提示tnfα主要在皮损局部产生
1 ambach a, zilliken d, klingert b, et al.characterization of the mononuclear infiltrate in bullous pemphigoid.hautarzt, 1991, 43:81-85.
119>0.05
11.6±4.2
9例pv患者的活动期血清和疱液中tnfα及stnf-rⅰ的测定结果表明:①pv疱液和血液中stnf-rⅰ明显高于对照,且疱液又明显高于血清,说明stnf-rⅰ可能与pv发病机制有关,而且皮损处可能有大量stnf-rⅰ产生②血清中tnfα含量低于对照,而疱液中却明显高于对照(p<0.01),提示tnfα在皮损处大量产生,血清中tnfα的低含量可能与高浓度的stnf-rⅰ的结合消耗有关③pv疱液中tnfα含量高于对照,而bp疱液中却低于对照,提示在pv发病中有更多tnfα产生,在pv水疱形成中起更重要的作用也许正因为pv水疱中含较高浓度tnfα这一炎症介质使得pv水疱炎症程度往往较重,说明tnfα在pv和bp的发病机制中所起的作用有所不同
肿瘤坏死因子α
作者:陈向东 翁孟武 陈洪 苏玮 侯爱琴
肿瘤坏死因子α(tnfα)是一种多功能的细胞因子,它不仅对肿瘤有直接的细胞毒作用,还具有多种免疫调节活性与之相对应的可溶性肿瘤坏死因子ⅰ型受体(stnf-rⅰ)在调节tnfα的生物学活性中起了很大的作用我们对40例自身免疫性大疱病患者的血液和疱液中tnfα及stnf-rⅰ进行测定
11
因子α及可溶性肿瘤坏死因子ⅰ型受体的测定结果(pg/ml)
chen xiangdong,weng mengwu,chen hong,et al.
血清
<0.01
11
材料和方法
可溶性肿瘤坏死因子ⅰ型受体
4.55
缓解期
3.2±5.5
(二)11例bp患者活动期和缓解初期血清中tnfα、stnf-rⅰ的比较见表2bp缓解初期血清中stnfrⅰ水平较活动期高另外,我们还对2例疗效不佳一直未愈的bp患者发病初期、病程4周和8周时血中stnf-rⅰ水平进行动态观察,检测结果分别为2150、1800、1600pg/ml和1275、1175、1050pg/ml,均显示stnf-rⅰ在4周和8周时反较发病初期逐渐降低
levels of tumour necrosis factor α and its soluble receptor type ⅰ in sera and blister fluids of patients with autoimmune bullous dermatoses
-
6.07
结果
1.1±2.2
31
单位:陈向东 上海第二医科大学附属第九医院皮肤科;翁孟武(指导者) 苏玮 侯爱琴 上海医科大学附属华山医院皮肤科;陈洪 上海第二医科大学微生物教研室
活动期
表1 类大疱病与大疱病患者活动期血清和疱液肿瘤坏死
1907±1139
60.1±55.3
-
项目
3.9±5.3
2 尹国华,张开明,周敏.皮肤病疱液tnf含量测定及其意义.中国实验临床免疫学杂志,1995,7:31-32.
关键词:类大疱病;大疱性大疱病肿瘤坏死因子受体;肿瘤坏死因子
正常人对照
(二)血清和疱液:所有患者同时抽取未经治疗(1个月内未用过皮质类固醇或免疫抑制剂)的活动期(指患者不断出现水疱或红斑)血液及24h内新发之水疱疱液11例bp患者在病情控制后即抽取缓解期(指治疗后无新发水疱,无明显炎症约1周)血液离心后分别取血清及上清液,分装,-30℃保存另外,30例正常人血清及15例正常人的吸疱液作为对照
±s
-
类大疱病
8.6±12.3
肿瘤坏死因子α
t值*
1106±306
表2 11例类大疱病患者活动期和缓解期血清肿瘤坏死因
可溶性肿瘤坏死因子ⅰ型受体
(收稿:1998-10-06修回:1999-09-01)
34.7±26.6
156
3432±1470
<0.01
department of dermatology,huashan hospital
p值
-
类大疱病
例数
<0.01
大疱病
(一)病例:40例患者均选自本院门诊或住院病例,其中类大疱病(bp)31例、大疱病(pv)9例男23例,女17例,平均年龄(56±20)岁(25～98岁)所有病例经临床、病理、dif、iif及1mol/lnacl盐裂后免疫荧光证实,并排除其它感染情况
758±238
9
p值
(四)统计学方法:检测数据用spss统计软件进行统计学处理变量用秩和检验或t检验
2.6±7.7
of shanghai medical university,shanghai
30
中华皮肤科杂志 1999年第6期第32卷 论著
-
参考文献
p值
注:*与正常人对照比较
-
9
<0.01
例数
3 zentner a, rredl j, grelle i, et al. elevated levels of soluble tumour necrosis factor receptor i in blister fluids of bullous pemphigoid and suction blister. arch dermatol res, 1994, 286:355- 357.
(一)31例bp、9例pv患者活动期血清、疱液中tnfα、stnf-rⅰ的检测结果见表1bp、pv患者活动期疱液和血液中stnfri水平均高于对照,且疱液中浓度更高bp患者活动期血液和疱液中tnfα的含量明显低于对照pv患者血液中仅测到极低浓度的tnfα,而疱液中tnfα浓度明显高于对照
519
大疱病
-
t值
子α及可溶性肿瘤坏死因子ⅰ型受体的测定结果(pg/ml)
<0.01
【 abstract】 objective to determine the relationship between tumour necrosis factor α (tnfα ) and its soluble receptor type ⅰ (stnf-rⅰ) and their significance in autoimmune bullous dermatoses.methods the levels of tnfα and stnf-rⅰ in both sera and blister fluids of 31 cases with bullous pemphigoid(bp) and 9 cases with pemphigus vulgaris(pv)were investigated by elisa.fifteen suction blister fluids and 30 sera from normal individuals were taken as the control.results at active stage, the levels of stnf-rⅰ were higher in both the sera and blister fluids from patients with bp and pv than those from the controls,and were much higher in blister fluids than in sera.the serum level of stnf-rⅰ was even higher at early remission stage than at active stage of bp.there were traces or undetectable amount of tnfα in both sera and blister fluids of bp cases. tnfα level was much low in sera of pv cases, but higher in pv patients′ blister fluids than in control group′s.conclusion stnf-rⅰ and tnfα might be related to the pathogenesis of the two diseases, and the former might exert a protective effect on the inflammatory reaction and might serve as a new indicator for evaluation of the severity of bp and the effectiveness of therapy. the effects of stnf-rⅰ and tnfα in bp and pv might be different. tnfα might be much important for blister formation in pv.
579.5
71
t值
p值
t值*
3.38<0.01
±s
4.83
1054±436
-
<0.01
<0.01
北京牛皮癣最好医院
